如何养出状态好、形态正常的细胞
自从换课题做了动物行为实验后，我才意识到养细胞真的是一件惬意、悠闲、easy的事。坐在细胞室，吹着空调，周围都是无菌环境，啧啧啧啧。
再看看动物房！！！！！！恶臭，阴森，随时有可能献上肉体当饲料，再加上空气里弥漫着的颗粒，我的过敏性鼻炎啊！这还不算啥，重要的是个体差异！个体差异！个体差异！更重要的是我研究的方向是情绪！！！！！！
“（志玲姐姐般的娇嗔）乖宝宝~~别跑！来哥哥给你打一针，不疼的哦，忍一忍就过去了呢，今天打针针你都没有叫，好棒哦！一会测试要好好表现哦，么么哒！”
额，自己都听不下去了！旁边一个护理老鼠的兄台匆匆结束操作，离开关上门的一瞬间，我听到了他的惨叫~~~~~~
曾经有个养细胞的活摆在我面前，我没有珍惜，现在追悔莫及，如果再给我一次机会的话话话话话话......
“师妹，来吧，还是让师兄跟你分享下如何养出来状态好形态正常的细胞吧，就当过过干瘾！”
新买到的细胞一定要多保种几支，以免玉石俱焚。有些细胞对传代数有要求，所以保种弥足珍贵，这样一旦你养的状态不好了，可以复苏新的。
血清好坏是关键，国产的真的效果不太好啦。建议有条件的尽量买进口的，切记要找一级代理购买，可以去官网鉴别真伪，我们实验室上次购买的国外很著名牌子的血清，居然查不到批号，结果我们直接封杀了代理公司。推荐几个比较不错的血清厂家Gibco、Hyclone、BI（绝对不是打广告）。血清开盖后建议分装储存，以防反复冻融（小窍门：可以分装到若干个50ml和10 ml的EP管中，配置培养基时正好每500ml一瓶的培养基中加入一管50 ml和一管10ml的血清，即可配成10%血清的培养基）。有的血清在融化后会有析出，建议一定要离心，去除杂质后再配置培养基，不然养出的细胞看着背景不干净。
另：自配溶液一定要用超纯水配置。
细胞较少时，会长的比较慢，往往越往后会群集性生长，导致接触抑制（竞争抑制），抑制了增殖速率，状态也较差。此时可以将其消化处理，然后重铺于新换的培养瓶培养，会收到很好的效果。当然也可以适当提高一点血清浓度，促进生长，但通常不建议这样长期培养。
养细胞要比对待女朋友更贴心，培养基以及血清浓度要根据细胞官方网站的说明书选择；培养基、胰酶、PBS使用前均需在水浴锅37°C预热，这样可以减少对细胞的刺激，利于其保持状态。一些正常组织的细胞（非改造过的）不仅生长缓慢，而且非常脆弱，除了上面说的适宜的培养环境、试剂预热外，还要降低胰酶浓度，以减少对细胞的损伤。消化时间也要特别注意，尽量在细胞收缩而未脱落时终止消化，然后将细胞吹打下来。
要根据细胞特性因地制宜，如令很多人头疼的RAW264.7细胞，不当处理或者传代太多都会导致其分化、长出伪足，所以除了初期保种外，细胞传代不要用胰酶消化，直接用枪吹打下来即可，这样可以降低损伤。
细胞经常会养着养着就有很多“杂质”（如图，有可能是代谢物、细胞碎片），尤其是时间久远的细胞，这个时候就会影响它的状态和美感，那么如何去除这些“杂质”呢？
个人经验，屡试不爽。首先弃掉培养基，PBS多洗几遍，如果你的细胞贴壁比较牢固，或者活的比较坚强，那你可以使用没有预热的PBS（冰箱取出，室温放置10min），这样使细胞稍微收缩，暴露出这些“杂质”；加入胰酶消化处理，此时在镜下观察，这些“杂质”会优先于细胞漂起来，然后及时弃掉胰酶，此时观察细胞状态，如果贴壁还是相当牢固，可以在加入胰酶再消化，重复上述操作。加入培养基终止消化，将细胞吹打下来，转入EP管中。1000rpm离心4 min。弃上清，再加入PBS，吹打均匀，再离心，视情况可以重复2遍，然后将细胞加入新的培养瓶中继续培养。这样可以明显减少“杂质”的存在。
师妹珍惜养细胞的日子吧，多幸福啊！