教科书都找不到答案，尿白细胞假阴性的真相究竟是什么？
仅供医学专业人士阅读参考
一文读懂，全是干货！
前言
尿干化学法中白细胞膜块所测定的白细胞为中性粒细胞酯酶，该酯酶在中性粒细胞中含量最多，单核细胞次之，淋巴细胞（见于肾移植术后）不含此酶。
但最近遇到的一例尿液中性细胞增高，但干化学却阴性？究竟是什么因素导致的呢？在查阅相关书籍后，竟然神奇的发现书中没有记载，而最终的答案也超乎大家想象。
案例经过
12月13日下午班，在审核尿常规30号标本时，发现尿干化学白细胞阴性，但尿有形成分沉渣计数仪UF-500i却有白细胞？如图1。
尿干化学法：PH 6.5，SG 1.015，余均阴性。
尿沉渣计数：白细胞87.3个/uL，管型11.5个/uL。
图1
将尿液离心、镜检，如图2、3，发现镜下WBC＋1/HP，与沉渣分析仪结果符合。
图2，低倍镜下视野，电脑拍摄
图3，高倍镜视野，电脑拍摄
说明：电脑拍摄只能拍摄显微镜某一个区域的视野，故上图中的白细胞在显微镜下会更多。
考虑到尿干化学法中测定的白细胞是中性粒细胞，而显微镜下只能辨别尿中的该细胞为白细胞，却无法区分该细胞究竟是中性粒细胞还是单核细胞、淋巴细胞。于是，滴加酸性溶液（如白细胞稀释液，也就是2%的冰醋酸溶液），如图4、5，可见分叶核，故该患者尿液中的白细胞为中性粒细胞。
图4
图5
既然尿中的白细胞都是中性粒细胞，那为什么干化学法的试纸条却检测不出来？难道尿中有干扰物质？
自此，开启了一段尿液真相的探寻之路·····
1、最常见的干扰物质：维生素C，但在该患者尿液中维C却是阴性，故最先排除。
2、那会不会是药物的因素影响，如头孢氨苄？进入医生工作站，查询医嘱信息，发现药物医嘱一栏中，有甘露醇、0.9%氯化钠、烟酸、头孢呋辛钠、5%葡萄糖、氨甲环酸，未见头孢氨苄，如图6。
图6
注意：头孢氨苄为第一代头孢菌素，尿代谢率为90%；头孢呋辛为第二代头孢菌素，尿代谢率也为90%。[1]
翻阅检验操作规程第4版和检验教科书，只提到头孢氨苄可导致白细胞假阴性，并未提及头孢呋辛，故暂且不考虑。
3、查阅教科书[2]，如图7，影响白细胞假阴性的因素有：蛋白质、维生素C、葡萄糖、头孢氨苄。而本案例中该患者尿干化学蛋白质、维C、葡萄糖均阴性，故排除。
图7
4、查看《全国临床检验操作规程》第4版，如图8，导致白细胞假阴性的因素有：尿中四环素浓度高、维生素C、汞盐、胰蛋白酶抑制剂、草酸盐；1%硼酸；含黏液标本、含淋巴细胞标本。对照该患者尿干化学结果、医嘱信息、镜检结果，均不符合，又一次排除。
图8
柳暗花明
所有可能的因素都被逐个排除，导致是什么在干扰该患者的白细胞结果？镜下WBC+1/HP，尿干化学不可能检测不出来，我们所使用的试纸条并未过期，仪器状态又是正常，一定还有什么细节被自己忽略了。
在操作规程介绍影响尿试纸条结果的因素中，有一小段文字提及（如上图8）：本表所收集资料来自几种商品试带的情况。个别试带因所用试剂不同，出现假阴性和假阳性的情况也不同。应注意阅读产品说明书。
一语惊醒梦中人，对啊，还有试纸条的说明书啊，看看是否还有其它被忽略的影响因素。
查看尿干化学试纸条说明书，在检验结果解释一栏中找到关于白细胞的叙述：低比重尿、碱性尿白细胞容易溶解，造成白细胞测定结果比镜检结果偏高。高比重尿、淋巴细胞尿、高葡萄糖尿（55mmol/L以上）及室温较低时（20℃以下）可造成白细胞测定结果偏低或假阴性。头孢氨苄、先锋霉素、四环素均可抑制反应，使结果偏低或出现假阴性，如图9。
图9
对照本案例患者的尿液结果，排除高比重（SG为1.015）、淋巴细胞尿（镜检加酸为中性粒细胞）、排除高葡萄糖尿（葡萄糖阴性），同时也排除说明书中的三个药物，因为患者并未使用。
所有的可能性，逐个被排除，只剩最后一个因素：室温低于20℃！对啊，下午自己在临检值班，把空调关掉了，而尿液分析仪又恰巧在窗口放置，临检窗口的温度早已经下降到与外面温度一致，而当天的温度又是降温非常快的一天。
一锤定音
为验证温度因素是否真正的导致了尿WBC假阴性，于是进行一番试验，在室温低于20℃下，将尿干化学试纸条插入装有患者尿液的试管中，如图10，白细胞膜块颜色不随时间推移而改变。
图10，室温20℃以下
随后将尿液试管放置37℃水浴箱温育1分钟，取出试管，插入新的尿干化学试纸条，如图11，白细胞膜块竟然显色了！
图11
将变色后的试纸条上机测试，结果如图12，WBC+2。
图12
经过千回百转的探寻与验证，最终可一锤定音，导致本案例尿干化学WBC假阴性的“真凶”竟然是温度！
案例分析
1、温度因素对检验项目的影响，我们会惯性思维的认为是生化项目、发光免疫项目、微生物血培养、血常规冷凝集等，这些项目对37℃的要求比较高，而大小便常规检查对温度的要求，往往会被忽略掉。
2、此次发现尿干化学WBC假阴性是由于温度导致的，纯属一次意外的收获，恰好由于自己值班繁忙，关闭了空调。
3、由于较多的实验室在场地设置上，会将二便等临检项目设置在窗口位置，而窗口位置又正好是连接外部走廊的通风口处，这也给低温创造了一个“良好”的影响检验结果的机会。
4、本案例中患者尿常规结果在排除诸多干扰因素后，发现教科书及操作规程均未提及的影响因素，却在试剂说明书找到，这也告诉我们在分析检验结果的真假时，掌握仪器的相关性能和熟悉试剂说明书的优缺点、局限性是必不可少的一门功课。
5、需要引起重视的是，在基层医院实验室，由于空调制热能力不佳，需要格外注意温度对检验项目的影响，如白带常规中的滴虫、大便常规中的滋养体、小便常规中的白细胞，谨防出现假阴性结果，进而误导临床诊疗。
总结
通过此次尿常规白细胞假阴性，发现原来温度也可以是一个影响因素，只是我们经常会忽略或者认为不重要。
[1]丁香园,《多图对比：头孢有四代代代皆不同》,2017-08-04
[2]许文荣,林东红.临床基础检验学技术[M].北京,人民卫生出版社,2015:147
[3]尚红,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程第4版[M].北京,人民卫生出版社,2015:163
本文来源：检验医学网