慢病毒包装技术构建原理

慢病毒属于逆转录病毒科,名称源自该种病毒长达数年的潜伏期,其中最为人所知的是人类免 疫缺陷病毒(HIV-1)。HIV-1 直径约 120nm,含两条正链 RNA,可有效的进入细胞核中,对分裂 期细胞及非分裂期细胞均具有很高的感染效率。慢病毒感染细胞后可将所携带的基因整合到细胞基 因组中,并且长时间持续稳定表达,同时能够随细胞分裂稳定遗传下去,因此成为导入外源基因的 有效工具。

慢病毒载体是以 HIV-1 为基础改造获得的基因治疗载体,通过去除致病基因,同时减少辅助质粒与载体质粒的同 源性,使慢病毒具有了滴度更高、生物安全性更好、导入外源片段的能力更强等特性。目前慢病毒系统已经广泛应用到基因过表达、RNA 干扰、miRNA 研究及基因敲除等功能研究的细胞实验和动物实验中。

慢病毒颗粒用途:

• 感染原代细胞；

• 制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株；

• in vivo 的基因操作；

• 转基因动物，特别是转基因大鼠的制备。