细胞模型怎么选择？

在人和小鼠等二倍体生物的细胞中存在两个染色体组，在两个同源染色体相同位置出现的基因我们称之为等位基因。当这两个等位基因完全相同时，我们就说这个细胞是纯合子，而当两个等位基因不同时，这个细胞就是杂合子。也就是说，同一个细胞，在某对等位基因上是纯合子，在另一对等位基因上也可以是杂合子。

具体到基因敲除的模型构建上来说，单个基因的敲除，涉及到一对等位基因的敲除，和单个等位基因的敲除。自然而然的，敲除一对等位基因就比敲除单个等位基因的效率要低，因此工作量也就大很多，也就造成很多公司报价上的差异。

作为生命科学未来的“包工头”，以后分分钟要管理上千万的项目资金，我们肯定得科学地省钱，破除封建迷信，当然土豪随意。

纯合子、杂合子该如何选择

在利用功能缺失策略对基因进行研究时，也就是基因敲除啦，一般情况下我们都是需要纯合子敲除细胞系的（除非纯合致死）。这时候，我们要记住一点，在设计实验的过程中需要结合我们的实验目的和下游检测手段，最终设计出合理的上游实验。也就说，对于基因敲除的下游验证，一般是Western Blot和免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)。在Western Blot的验证中，野生型和杂合子相比，理论上目的基因的表达量只是减少一半，甚至有些时候因为遗传补偿效应目的基因的表达量减少不了一半。毫无夸张地说，杂合子的敲除细胞系还不如做个敲低稳定细胞系来得靠谱。因此，对于敲除细胞系，还是花点精力或费点经费整纯合子会靠谱点。

而在某些情况下，我们并不要求纯合子，杂合子细胞模型就能出色解决问题了。比如，我们一位同学想要研究目的蛋白在胚胎干细胞分化过程中的动态，这时就涉及到了蛋白体内动态模型的模拟和构建。由于是个动态过程，细胞需要进行分化，而且目的蛋白的调控方式不能被改变，因此只能通过KI（knock in）的方法在目的基因的终止密码子前插入荧光蛋白标签，而后续涉及到的是活细胞成像技术。在这种情况下，目的蛋白不需要做到蛋白定量，因此也就不需要要求纯合子。

就是酱紫，可以说无论是站在科研投入还是实验可行性的层面，实验思路和实验设计将是决定研究是否能顺利进行的关键部分。在当前各种实验均可外包的科研环境下，小编认为科研人员更应该在实验思路和课题方向预测的层面下功夫。