ROR1，实体瘤CAR-T细胞治疗的新靶点

I型受体酪氨酸激酶样孤儿受体(receptor tyrosinekinase-like orphan receptor 1，ROR1)是ROR受体家族中的跨膜蛋白，参与细胞间信号交流、胞内信号转导等过程，调节细胞增殖、分化和转移。

ROR1在胚胎发生过程中主要由神经嵴细胞表达，出生后脂肪组织中存在少量的表达，在胰腺、肺、B前体细胞也有极少量的表达，但在多种实体瘤中有高表达。如肺腺细胞癌、乳腺癌、黑色素瘤、肾癌、胃癌、大肠癌等多种实体瘤细胞。

Wnt信号通路参与成体细胞增殖，分化和凋亡过程。信号转导通路包括经典的Wnt通路和非经典Wnt/JNK通路及Wnt/Ca2+通路等，信号转导通路出现异常导致肿瘤生成。ROR1被认为是Wnt5a的独特受体，并参与器官的发生和癌症转移中的非经典Wnt信号转导。

ROR1的表达与AKT和cAMP反应序列结合蛋白（CREB）的激活有关。这些蛋白在许多人类癌症中过度表达和/或结构性磷酸化，并被认为在肿瘤的发生和发展中起直接作用。同时发现在癌细胞系或原发肿瘤组织中，ROR1的表达和AKT的激活之间存在显著的相关性。

鉴于ROR1在多种肿瘤细胞上高度表达，而在正常组织中表达量较低的特征，其肿瘤特异性表达和潜在的功能重要性，ROR1作为新型免疫疗法的靶标已引起人们的关注。

嵌合抗原受体是一种基因工程受体。CAR基因的结构包括４部分：①带有单链可变片段的细胞外抗原识别区（scFv）；②胞外铰链区；③跨膜区；④ 细胞内信号包括Ｔ细胞受体（TCR）的信号转导成分。嵌合抗原受体T细胞疗法指抽取患者血液，提取、扩增Ｔ细胞，并经基因工程改造，使T细胞表达特异性抗原结合位点识别肿瘤抗原，再将细胞回输入患者体内，从而特异性杀伤肿瘤细胞的治疗方法。目前最成功的是针对CD19的治疗急性淋巴性白血病的CAR-T，在临床试验上已取得令人瞩目的成绩，目前已经有多个针对血液瘤的CAR-T产品上市。

ROR1是分子高度保守靶点，该靶点在人类和灵长类等动物中高度同源，并有相同的组织表达分布，BERGER等研究显示，将抗ROR1 CAR-T从静脉输注于猕猴后，未发现明显组织毒性。

陈玥等人构建了靶向ROR1的嵌合抗原受体修饰的T细胞，体外实验显示，针对阳性靶细胞MDA-MB-231和Calu-1，在2:1、4:1、8:1的效靶比条件下，CAR-T组中释放的IFN-γ均高于对照组。但CAR-T与阴性靶细胞共培养后，IFN-γ几乎没有释放，即使在高效靶比（8:1）时释放量也很少，LDH也产生较少。这证明了ROR1 CAR-T对于ROR1阳性的肿瘤细胞有特异性的杀伤作用，并且脱靶性的危险较小。

Xia L等人设计了靶向EGFR的最佳第三代CAR, 在体内和体外均评估了感染EGFR CAR慢病毒 （ EGFR CAR T) 的T淋巴细胞对三阴性乳腺癌 （TNBC) 的疗效，结果表明EGFR CAR-T对TNBC表现出有效的特异性抗肿瘤活性。

基因修饰改造的CAR-T细胞，尤如导弹一样能够特异性识别、结合并清除带有肿瘤抗原标志的肿瘤细胞，因而靶点是肿瘤细胞能否被CAR-T细胞成功识别的关键。理想的靶点既要保证CAR-T细胞特异性杀伤肿瘤细胞，又不伤害或极少伤害到正常细胞，以尽可能减少脱靶效应。

ROR1具有原癌基因的一些作用，且在肿瘤的发展中发挥着促进肿瘤细胞生长及增加肿瘤迁移能力的作用。由于ROR1在正常组织中不表达或极少表达，因而有希望成为实体瘤CAR-T细胞治疗的一个理想靶点。