基因敲入小鼠(Knockin mice)制备技术方法
制作转基因小鼠时,外源基因是随机插入基因组的,具体插入哪个位置不一定。
基因敲入技术可以实现把外源基因准确的插入到指定位置,其原理、方法都和Knock out一样。
最开始,人们使用Knockin技术是为了制备Cre小鼠,Cre被插入到ROSA26基因后面,因为ROSA26是一个在所有细胞都表达的一个基因。Cre放在这个基因后面,可以得到全身表达Cre酶的小鼠。
后来Knockin技术被更多方式的应用,比如把绿色荧光蛋白(GFP)基因放在目的基因末尾,使目的基因与GFP融合表达,那么使用荧光显微镜观察表达绿色荧光的细胞即为表达目的基因的细胞,巧妙的发现该基因的表达位置
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