酵母表达载体是什么?
结构组成及表达元件
来自pBR322基本骨架 含有该质粒复制起始位点(ori),lacZ基因、bla或ampr、tetr等基因。含有URA3、HIS3、LEU2、TRPl、LYS2与特定的宿主营养缺陷突变体互补筛选或利用zeocin、basticidin(杀稻瘟菌素)的抗性基因筛选。启动子有GAP、AOXl、AUGl和GAL1等。
特点或优点
GAP是组成型启动子。其余是诱导型启动子。酵母表达载体多为穿梭载体:既可以在大肠杆菌中繁殖,获得足够的载体DNA进行体外操作,又可以在酵母中复制、表达和选择。融合蛋白表达载体:于外源基因插入位点的C端或N端插入了1个6×His标签,或在5’端插入了α-因子作为分泌信号
备注
由于原核生物和真核生物存在糖基化、酰基化等翻译后修饰反应机制的差异,真核基因的原核表达难以获得有活性的蛋白。酵母成为真核表达的首选系统。
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