JC-1——快速检测分析线粒体膜电位变化
JC-1 检测线粒体膜电位(Membrane potential)原理:
在细胞凋亡的过程中往往伴随着线粒体跨膜电位的破坏,这被广泛认为是细胞凋亡过程中zui早发生的事件之一。线粒体膜电位的检测有很多方法,JC-1的流式检测是比较常见的一种方法。
JC-1有单体和多聚体两种存在状态,低浓度时,以单体存在,可检测到绿色荧光,用流式检测时,通常为FL-1通道(和FITC同通道)高浓度时,以多聚体存在,可检测到红光,流式检测通常为FL-2通道(和PE同通道)。因JC-1浓度的变化,在单体和多聚体之间形成一个可逆的转变过程。
正常细胞,膜电位正常时,JC-1通过线粒体膜J性进入线粒体内,并因浓度升高而形成发射红色荧光的多聚体,而凋亡细胞,线粒体跨膜电位去J化,JC-1从线粒体内释放,浓度降低,逆转为发射绿色荧光的单体形式。故而可以通过检测绿色和红色荧光来定性(细胞群的偏移)定量(细胞群的荧光强度)的检测线粒体膜电位的变化。
近年来研究发现线粒体功能状态和不少疾病的密切相关,多种细胞在不同因子作用下发生凋亡时均伴有MMP的下降,而检测线粒体膜电位(MMP)的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。
如何快速检测分析线粒体膜电位变化?
我们可以通过JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降,同时也可以用JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。Abbkine线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)#KTA4001 就此提供了一种简单的方法,基于JC-1来检测线粒体跨膜电位的变化,区分健康和凋亡细胞。在健康细胞中,这种染料在线粒体中积聚并聚集,在线粒体中形成明亮的红色荧光团块。任何消除线粒体膜电位的事件都会阻止JC-1染料在线粒体中的积累,因此,染料以其单体形式保留在细胞质中,导致红色转变(聚集的JC-1,Ex/Em = 585/590nm)至绿色荧光(JC-1单体,Ex/Em = 510/527nm)。
JC-1可用作多种细胞类型中线粒体潜力的指标,包括肌细胞和神经元,以及完整组织和分离的线粒体。此线粒体膜电位分析试剂盒试剂盒含有CCCP,其引起质子梯度的解偶联,降低线粒体电化学电势,可作为对照。
线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)特点:
1.作为细胞健康的指标,检测线粒体膜电位。
2.使用JC-1,一种荧光,亲脂,阳离子染料。
3.红色荧光表示健康的线粒体,绿色荧光表明健康状况不佳的线粒体。
4.针对流式细胞仪或荧光显微镜进行了优化。
5.含有CCCP(强效线粒体氧化磷酸化解偶联剂)。
Abbkine线粒体膜电位分析试剂盒(JC-1)分析Hela细胞。A:膜电位正常的细胞(红色);B:膜电位异常的细胞