怎样进行蛋白质保存？

一、切记蛋白质的储存标准

超低温、分装、浓缩、冷冻／速融、添加剂

二、储存方法你了解多少

蛋白质的的储存方法的挑选彻底在于蛋白质的可靠性以及储存后何时再次使用你的蛋白质。

1、如即提即用的话，可将浓缩蛋白质存储在单一溶液（如PBS），放置聚丙烯管或整洁的玻璃容器中，放到4°C冰箱储存。

优势：蛋白质非常容易得到，能够迅速开展试验，且同一管样品可反复抽样，那样防止了因常常解除冻结而加快蛋白质的溶解。

缺陷：很有可能会遭遇微生物菌种污染，蛋白质失活和氧化，很有可能对试验数据信息的均一性导致危害。要防止这类状况，能够把蛋白质分为大份存储，并添加蛋白酶缓聚剂、抑菌剂和氧化剂等。但也需要依据自身蛋白质的状况，假如你的蛋白质是详细的膜蛋白或分泌蛋白,很可能分子结构内存有二硫键，为确保其一致性，应当储存在氧化环境中。此外，存储時间超出一个月的蛋白质能够考虑到丢掉。

2、分析到适合的缓冲溶液中能够冻干，放4°储存；也能加浓度较高的的硫酸铵（你的蛋白质不沉积的话），4°储存。

留意：你需要留意添加硫酸铵后pH会降低一些，你的缓冲溶液可不可以太贴近蛋白质的等电点啊，蛋白质在等电点周边沉积许多情况下是不能复溶，即便复溶活力也不可以确保。

3、提纯后的蛋白质测浓度值后，添加50%凡士林，确定搅拌后分装，液态氮冷冻，放进-20度或-80度储存，特别是在适用抗氧化物。

优势：在超低温下，蛋白质对微生物菌种污染，蛋白酶溶解和氧化还原反应更有抵抗能力，非常容易确保其活力。用凡士林或乙二醇稀释液使蛋白质处在溶液中，能够便捷抽样。除此之外，这类方法存储的蛋白质能够储存长达一年，针对抗体轭合物是一个好的挑选。

缺陷：蛋白质在-20°溶液中仍有可能遭到水解反应、污染和氧化，假如蛋白质对氧化性环境规定较为高，也需添加缓聚剂、氧化剂等。并且将样品储放在50%冷冻保护膜中有时候是不可取的，在于你下面要做的试验。

4、有一些蛋白质能够不用凡士林，立即液态氮冷冻数分钟，-80度储存。

优势：能够长期性储存（很多年)，不用凡士林、叠氮化钠等化合物，防止蛋白质溶解或微生物菌种污染。

缺陷：冷冻蛋白质应一次性使用，为了更好地防止不断冻融循环产生溶解。除此之外,抗体轭合物(尤其是碱性磷酸酶一氧化氮合酶)冷冻后很有可能会降解。

5、长期性储存蛋白质的另一个方法是冻干（lyophilization）。

优势：蛋白质冻干后会展现膨松的白色粉末方式，处在彻底脱干的情况，能够在冰箱中无期限储存。

缺陷：针对一些蛋白质，冻干实际操作有一个潜在性难题便是蛋白质不可以复溶。冻干／复溶的全过程一样会对蛋白质造成一定的损害功效。

三、这种关键你需要了解

1、确保稳定的pH值，一般PBS更为常见；

2、确保一定的蛋白质浓度值，假如浓度值较为稀的话，能够考虑到加上一定量的BSA；

3、凡士林的加上也可以在非常大水平上提升抗体的可靠性；

4.为了更好地防腐能够加上一定量的叠氮化钠（辣根过氧化物酶偶联反应的二抗一般不可以加），假如样品要用以分子生物学检验，防止使用添加剂。

5、不论是冷冻或是存储在溶液中，将蛋白质开展分装，以防止冻融循环，减少污染的风险性。

6、开展蛋白质实际操作试验时一定要带手套，们的肌肤上面有一些蛋白酶，这种蛋白酶很可能会溶解掉大家的蛋白质样品。肌肤上的别的化学分子也很有可能会污染蛋白质样品。此外，为了更好地避免病菌的生长发育，蛋白质最好是储存在杀菌的小管中。

7、防止不断冻融循环或冻体力劳动融解全过程，那样很可能会减少生物活性。

8、防止震荡，震荡造成的剪切力有可能会对蛋白质造成毁坏功效。震荡时溶液中会造成气泡，O2的进到会造成蛋白质处于氧化环境中。蛋白质中带有半胱氨酸，其非常容易被氧化为胱氨酸，这一全过程很可能会破环蛋白质的活力。