饲料中病毒的存活得到证实,涨知识啦

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通过摄入水或饲料引起感染需要多少非瘟病毒?首次确定了在水中和饲料中产生ASF感染的最低感染剂量。在饲料运输中非洲猪瘟病毒的半衰期中证明饲料也是一个容易将非瘟病毒带入场内的重要途经,病毒究竟能否在饲料这种介质中存活?存活时间有多久

本中再次验证从实验室研究条件下转化为现实世界,几种猪病毒可以在饲料原料中存活。

本实验涉及三种猪病毒——塞内卡病毒 A (SVA) 作为口蹄疫的替代品、猪繁殖与呼吸综合征病毒 174 (PRRSV 174)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)。接种病毒的饲料原料,以模拟商业饲料运输。

阶段1

项目一使用以下每种饲料原料 30 克:有机和常规豆粕、赖氨酸、胆碱和维生素 A。每一种都加入 2 毫升三种病毒的混合物,然后装载到商业运输车辆的拖车上。在接下来的 21 天里,饲料原料穿越了 14 个州,总共行驶了 6,053 英里。

在运输期结束时,成分样品通过聚合酶链反应检测病毒基因组,并通过生物测定检测活力。

报告在两种豆粕产品中都发现了可行的 PRRSV、PEDV 和 SVA。在维生素 A 样品中检测到活的 PRRSV 和 SVA。值得注意的是,SVA 是唯一能在赖氨酸和胆碱中存活的病毒,“更具挑战性的原料”。

该项目有助于建立对之前实验室发现的信心,但同时“30 克不是一个现实的数量,2 毫升是大量液体。所以,我们回到了绘图板上,开发了一个更真实的实验。”

阶段2

项目二使用了 1 吨的有机和常规豆粕和完整饲料,以更好地反映实际出货量。用“热点”模型为每个手提袋加标,这一过程涉及生产 10 毫升冰块,每个冰块含有 5 个对数 TCID50/病毒。冰块在 -80° C 下冷冻,然后倒入每个装满一半的手提袋中,然后用剩余的饲料装满,自然融化以形成热点。总共有七个手提箱——一个对照饲料,两个接种的有机和常规豆粕产品和全价饲料。

在旅途中,这辆 18 轮卡车从明尼苏达州的圣保罗出发,模仿了一条典型的商业路线,在 23 天内穿越 28 个州共计 6,719 英里,路上行驶 110.2 小时。“我们想让它尽可能多地暴露在区域[天气]变化中——寒冷、潮湿、炎热、干燥的温度。”

数据记录器被埋在每个手提袋内,每 15 分钟收集一次环境数据,如温度和相对湿度。此外,拖车上还安装了 GPS 跟踪器。船上没有其他产品,手提袋被封锁在拖车内。此外,除了加油站、酒店等基础设施外,没有其他站点。

测试和结果

为期 23 天的公路旅行结束后,从手提袋中取出成分样本,发现所有三个都存在活病毒,而对照饲料保持阴性。

下一步是将每个手提袋的 10 个样品(约 1 公斤)混合成一个复合样品,然后将其放入油漆罐中,加满盐水并机械摇动以产生充分混合。最后一步是离心样品以开发用于生物测定的接种剂。

从豆粕产品中产生的生物测定来确定病毒活力,通过 2 毫升肌肉注射、2 毫升口服接种或 2 毫升鼻内暴露使猪暴露。全价饲料通过自然采食行为提供给猪。

全价饲料中发现了 PEDV 和 SVA 的证据,但没有发现 PRRSV 的证据。然而,所有病毒都在豆粕产品中存活。“这是有道理的,因为在跨界 [运输] 模型中,我们表明 PRRSV 在大豆中存活得很好,但在全饲料中则不然。”

为了验证病毒感染的证据,研究人员使用了口腔液体测试、物理证据和个别猪的尸体解剖。

尽管本研究中采用的方法有很多优势,仍然存在一些局限性,即样本量和单一病毒剂量。我们可以证明生存,但我们无法预测频率这仍然是关键。

该研究提供了第一个证据,证明三种重要的猪病毒可以在现实世界的商业运输条件下在饲料和饲料成分中存活。

By 1 Dee S, et al. Use of two demonstration projects to evaluate viral survival in feed. 52nd Am Assoc Swine Vet annual meeting. 2021;53.

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