小鼠肠系膜动脉注射的基本操作过程及注意事项

肠系膜动脉是分布于消化管的动脉，主要分为肠系膜上动脉和肠系膜下动脉，结合小肠结构图来看，肠系膜上动脉分布于小肠左侧，肠系膜下动脉分布于结肠、大肠及泄殖腔部位，因此通过该方法可以感染小肠及结肠部位的细胞。具体方法如下（来源于参考文献[1,2,5]）：a.  保定完成后使用异氟醚麻醉小鼠；b.  通过左上方的皮肤进行1-2 cm的穿刺沿着腋线和侧腹的脾脏区域。切开腹外斜肌暴露SMA（肠系膜动脉）。使用微型牵开器将皮肤和腹壁固定，并用温暖的盐水纱布覆盖小肠防止回缩；c.  使用微血管放大器在放大20倍的情况下，将SMA轻轻地从腹膜后剥离，在近端伤口周围放置连接注射针，使用一个微型血管钳暂时夹闭血管腹主动脉；d. 将定制33号1/2'’英寸点式2型进样针（Hamilton; Reno, NV)）连接250 μl汉密尔顿TLL气密性进样针注射器插入肠系膜动脉，轻轻结扎血管保持稳定防止注射泄漏，随后进行病毒注射；e.  注射结束后取下注射器械，解除夹闭，使血液流回肠道组织。

肠系膜动脉注射示意图最后，小编对肠道系统的AAV注射方法及剂量进行总结，大家可以根据自己需求进行选择预实验的参考剂量，设置梯度，选择最佳剂量：肠道系统AAV感染范围及剂量参考注射方法感染部位参考剂量注射体积尾静脉注射全身大部分器官、血液系统＞2E11vg/只小鼠100-200μl灌肠结肠更易感（少量肠上皮细胞感染）4E10vg-1E11vg/只小鼠200μl大鼠700 μl腹腔注射腹腔肠道平滑肌、浆膜感染（无上皮细胞感染）＞1E11vg/只50-100μl（不超过10 μl/g）肠系膜动脉注射肠系膜上动脉小肠左侧（可感染上皮细胞）5E10vg-1E11vg/只100-200μl肠系膜下动脉结肠（更易感）、大肠、泄殖腔（可感染上皮细胞）