【求助】培养基是灭菌前调PH还是灭菌后调节?

如果是灭菌前调节,灭菌后培养基PH发生变化该如何?如果灭菌后调节,怎样保证用PH计测量时不染菌?


常规的培养基应该是在灭菌之前调PH值,高压对大多数培养基的PH值影响不大(除非你的培养基含有特殊成份)。


一般是灭菌前调节ph,如果灭菌后调,容易染菌。而且培养基配方中的ph都是指灭菌前的ph。灭菌后,培养基ph一般会下降0.2


灭菌前调节ph


灭菌前调节ph


一本美国人k巴克编的由科学出版社出版的<分子生物学实验工作手册>上是这样认为的:灭菌培养基的ph不能高于7.5.必须在中性条件下灭菌,待溶液冷却后再用无菌的碱调节ph.没办法,科学来不得偷懒!我曾经配过ph8.0的LB,但是高压灭菌后再测实际只有7.8左右.所以别人说得还是有道理的.还有不要在ph6.0以下灭菌琼脂溶液.含有矿物盐的溶液不能和琼脂一起灭菌.葡萄糖不能和含有氨基酸/蛋白胨或者磷酸盐的组分一起灭菌.磷酸盐不能和含有氨基酸/蛋白胨或者其他矿物盐溶液一起灭菌.


玻璃瓶装培养基,灭菌前调节;
发酵用培养基,灭菌后调节。


lpp321 wrote:
一本美国人k巴克编的由科学出版社出版的<分子生物学实验工作手册>上是这样认为的:灭菌培养基的ph不能高于7.5.必须在中性条件下灭菌,待溶液冷却后再用无菌的碱调节ph.没办法,科学来不得偷懒!我曾经配过ph8.0的LB,但是高压灭菌后再测实际只有7.8左右.所以别人说得还是有道理的.还有不要在ph6.0以下灭菌琼脂溶液.含有矿物盐的溶液不能和琼脂一起灭菌.葡萄糖不能和含有氨基酸/蛋白胨或者磷酸盐的组分一起灭菌.磷酸盐不能和含有氨基酸/蛋白胨或者其他矿物盐溶液一起灭菌.

能解释一下这些配伍禁忌的原理吗?


wqwq69 wrote:
玻璃瓶装培养基,灭菌前调节;
发酵用培养基,灭菌后调节。

同意!我们的摇瓶和小罐都是消前调节,大罐是消后用碱调节!


发酵用培养基,灭菌后调节

这样如何避免染菌,是用PH试纸吗


cyuzi wrote:
发酵用培养基,灭菌后调节

这样如何避免染菌,是用PH试纸吗

一般来讲,培养基灭菌后,pH值都会下降,通常是加碱调节pH值,其实微生物在酸或碱的溶液中无法存活,尤其是碱溶液。工业生产中也有用液氨调节pH值的例子,如果实在是担心,加个滤器好了。发酵实验或生产,可灭菌的pH电极应该是很普及了吧,如果实在没有,就混匀后取样,用pH计测定好了,如果连pH计也没有,还是干脆别做这方面的研究了,哈哈,just kidding.


楼主得问题一定是对于在三角瓶或试管中得培养基灭菌后的ph有疑问,应该是在灭菌前测定,不过我认为应该做试验比较灭菌前后ph变化的规律。
我们有好多次发现培养基配方不同,灭菌前后ph的变化差异很大,有升高,也有降低,最重要的是应该用空白的培养基调整成不同的ph进行比较找出其中规律,或者在培养基中加入缓冲体系,可以最大限度的保证ph的相对稳定,在一些文献中看到也有人利用CaCO3来调节ph,CaCO3本身不溶于水对培养基影响不大,但是它的特性是在酸性环境中可以通过释放CO2来降低酸度,同时溶解到水中的Ca离子也是碱性离子,可以在一定范围调节ph。


摇瓶是灭菌前调节.罐子是灭菌后调节


sicy3 wrote:
摇瓶是灭菌前调节.罐子是灭菌后调节

有的罐子在灭菌前也要调ph,我原来做生产的中小罐消毒,在灭菌前都要调ph,灭菌后根据质检的检测结果决定是否要调。


其实,对于一般的培养基,无论是摇瓶还是发酵罐,都是在消前调pH。
对于摇瓶,在研究配方和工艺时有一项内容就要考察消前的初始pH,在确定后,再测定消后的pH,作为发酵罐上消后pH控制的依据。
由于发酵罐是蒸汽直接消毒,由于冷凝水的原因,pH一般要适当提高一点或降低一点(视培养基pH的酸碱性和冷凝水的量而定)。罐上只要控制住冷凝水的量,就能很好控制消后pH,无须消后再调(除非是操作失误!)。
对于少数特殊培养基,如几种成分需要分开消毒的,不在此列。


lpp321 wrote:
一本美国人k巴克编的由科学出版社出版的<分子生物学实验工作手册>上是这样认为的:灭菌培养基的ph不能高于7.5.必须在中性条件下灭菌,待溶液冷却后再用无菌的碱调节ph.没办法,科学来不得偷懒!我曾经配过ph8.0的LB,但是高压灭菌后再测实际只有7.8左右.所以别人说得还是有道理的.还有不要在ph6.0以下灭菌琼脂溶液.含有矿物盐的溶液不能和琼脂一起灭菌.葡萄糖不能和含有氨基酸/蛋白胨或者磷酸盐的组分一起灭菌.磷酸盐不能和含有氨基酸/蛋白胨或者其他矿物盐溶液一起灭菌.

能否将“分子生物学实验室工作手册”共享一下啊


都是灭菌前调 在微生物生长过程中由于PH 变化较大也有调节PH值的。


灭菌前调比较合理。灭菌后是补救措施。


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