从马兜铃内酰胺探讨鱼腥草安全性
摘 要：鱼腥草是常见的药食同源植物，具有数千年的食用、药用历史，现有研究表明，鱼腥草安全无毒。但由于鱼腥草含有马兜铃内酰胺成分，其安全性一直存在较多争议，而关于鱼腥草中马兜铃内酰胺毒性的探讨并不多见。从鱼腥草中马兜铃内酰胺的构效关系、量效关系、实验研究等方面对鱼腥草的安全性进行探讨，为鱼腥草的食品药品开发及应用提供参考。
鱼腥草为三白草科植物蕺菜Houttuynia cordata Thunb.的新鲜全草或干燥地上部分，别名蕺儿菜、折耳根、葅菜、蕺菜、臭菜等，为药食同源植物[1-2]。关于鱼腥草之名，最初见于东汉《名医别录》，东汉《吴越春秋》中称之为岑草，宋代《会稽赋》注：“岑草，蕺也。”汉代《说文解字》有云：“草祖，菜也。”清代段玉裁注解“草祖”即蕺菜[3]。
鱼腥草产于我国长江流域以南各省，在古籍中常称之为蕺。早在2000多年前，便有种植、食用鱼腥草的文字记载[3-4]。汉代张衡《南都赋》中写道：“若其园圃，则有蓼蕺蘘荷，薯蔗姜韭潘，菥蓂芋瓜。”唐代苏颂说：“江左人好生食，关中谓之菹菜，叶有腥气，故俗称：鱼腥草。”近代《清稗类钞》有更加详细的描述：“蕺为蔬类植物，通称蕺菜，野生，茎细长，高七八寸，叶为卵形。初夏开淡黄色小花，有苞四片，色白如花瓣，茎、叶皆有臭气，亦称鱼腥草。可食，亦入药。”由此可见，鱼腥草作为食物，已有数千年历史。特别在我国西南地区，深受人们的欢迎。
鱼腥草亦可入药，其味辛，性微寒，归肺经，具有清热解毒、消痈排脓、利尿通淋的功效，用于肺痈吐脓、痰热咳喘、热痢、热淋、痈肿疮毒等[1]。明代《本草经疏》记载鱼腥草“治痰热壅肺，发为肺痈吐脓血之要药”。研究表明，鱼腥草在抗病毒、抗菌、抗炎[5]、抗氧化等方面有着独特的药理活性，相关药品已广泛应用于临床[2,6]。有代表性的中药制剂有鱼腥草滴眼液、复方鱼腥草片、急支糖浆、连花清瘟胶囊、小儿咳喘颗粒、咳喘舒丸、祛痰灵口服液、宣肺止嗽合剂、辛夷鼻炎丸、止痛化癥片、复方鲜竹沥液等。
随着人们对鱼腥草化学组分解析的不断深入，部分生物碱成分，特别是马兜铃内酰胺引起了广泛关注。一段时期以来，有关鱼腥草是否致毒、是否安全的讨论此起彼伏。尽管关于鱼腥草食用药用的安全性已有报道[7]，但对鱼腥草中的关键化学成分马兜铃内酰胺的安全性尚缺乏系统性梳理和讨论。本文从鱼腥草中马兜铃内酰胺的化学结构出发，从构效关系、量效关系、实验研究等方面对现有文献进行综述，探讨鱼腥草的安全性，为相关食品药品研发及应用提供参考。
鱼腥草的化学成分复杂，主要含有挥发油、黄酮、酚酸、生物碱、萜类、苯乙醇苷、苯丙素等组分[5,7]，除挥发油外，其他组分均不挥发。在上述组分中，挥发油、黄酮为研究最广泛、最主要的药效成分，可以抗病毒、抗菌、抗炎、抗氧化等；而生物碱，特别是马兜铃内酰胺，则是被广泛关注的可能致毒组分。
截至2020年，已报道的鱼腥草中生物碱成分有阿朴菲型、马兜铃内酰胺、酰胺类、吡啶类、其他类生物碱5大类，其中马兜铃内酰胺类生物碱共发现了5个[8-15]。1992年，Prôbstle等[9]和Bauer等[10]首次从干鱼腥草中分离得到3个马兜铃内酰胺类化合物，分别是马兜铃内酰胺BII（aristolactam BII，又名头花千金藤酮B，cepharanone B）、马兜铃内酰胺AII（aristolactamAII）、胡椒内酰胺A（piperolactam A，又名马兜铃内酰胺FI，aristolactam FI）。1993年，Jong等[11]从干鱼腥草中分离得到了马兜铃内酰胺BII。2001年，Kim等[12]从干鱼腥草中分离得到了马兜铃内酰胺BII、胡椒内酰胺A、马兜铃内酰胺AII。2011年，Qu等[13]从鲜鱼腥草中分离得到了5个马兜铃内酰胺类化合物，分别是马兜铃内酰胺BII、马兜铃内酰胺AII、三白草内酰胺（sauristolactam）、胡椒内酰胺A、马兜铃内酰胺FII（aristolactamFII）。其中，三白草内酰胺和马兜铃内酰胺FII为首次报道。2013年，姚新生团队[14-15]从干鱼腥草中分离得到了马兜铃内酰胺BII、胡椒内酰胺A、马兜铃内酰胺AII。
鱼腥草中已知的5种马兜铃内酰胺分别为马兜铃内酰胺BII、马兜铃内酰胺AII、胡椒内酰胺A、三白草内酰胺、马兜铃内酰胺FII。它们均在菲环的3、4位上有甲氧基或羟基取代，化学结构见图1。
马兜铃内酰胺是一大类化合物的通称。Kumar等[16]归纳，1982—2003年人们共从天然植物中分离鉴定出57种马兜铃内酰胺类化合物，它们有共同的母体结构，不同的取代基（图2）。在药物化学中，药物的药效或毒性与化学结构密切相关。结构决定药效，57种马兜铃内酰胺类化合物的药理毒理存在较大差异。
由于要与DNA形成稳定的加成物，马兜铃酸/马兜铃内酰胺的化学结构需要满足一定的要求。
Balachandran等[20]较为全面地研究了马兜铃酸致毒的构效关系。研究表明，马兜铃酸的硝基是致毒不可或缺的因素，硝基经过还原反应，可与羧基缩合形成酰胺键，即马兜铃内酰胺。因此，马兜铃内酰胺的构效关系与马兜铃酸具有一致性。并通过细胞实验研究了多种具有马兜铃酸结构的化合物毒性，结果发现，马兜铃酸I [8-甲氧基-6-硝基-菲-(3,4-d)-1,3-二氧代-5-羧酸]的毒性最强；其他对于马兜铃酸I结构的修饰，如加成、消除、取代、侧链的移位等，均会较大程度地影响其毒性。马兜铃酸II [6-硝基-菲-(3,4-d)-1,3-二氧代-5-羧酸]和马兜铃酸I相比，移去了侧链上的甲氧基基团，它的毒性即有所减弱，但致突变性与马兜铃酸I相当。天然致毒的马兜铃酸实质上是指马兜铃酸I和马兜铃酸II的混合物，在诸多马兜铃酸中，马兜铃酸I和马兜铃酸II的毒性最强，马兜铃酸家族中的其他化合物毒性大大减弱。如马兜铃酸C去除了R1位的甲氧基，在R3位引入羟基，而变得无毒；马兜铃酸III中R1位的甲氧基移位至R3位，毒性消失。
因此，对于马兜铃酸的构效关系，可以归纳为向马兜铃酸I的结构中引入羟基，使其水溶性增加，可以有效解毒，如7-羟基马兜铃酸I、马兜铃酸D、马兜铃酸IVa等。菲环3、4位间的二氧代五元环的还原或甲基化亦可以使马兜铃酸毒性消失。马兜铃内酰胺因与马兜铃酸存在化学转化，构效关系与马兜铃酸相同。
然而，鱼腥草中的5种马兜铃内酰胺却非致毒结构。对于鱼腥草中含有的5种马兜铃内酰胺生物碱，马兜铃内酰胺AII、马兜铃内酰胺BII、胡椒内酰胺A、三白草内酰胺、马兜铃内酰胺FII均在菲环上引入了羟基或甲氧基，菲环3、4位间的二氧代五元环均被还原开环或取代，从而毒性消失（图3）。
此外，在PubChem数据库中检索5种马兜铃内酰胺的生物活性试验可知，马兜铃内酰胺AII通过CCRIS突变性试验（化学致癌研究信息系统中CCRIS 2996）被证实没有致突变性；马兜铃内酰胺BII、胡椒内酰胺A、马兜铃内酰胺FII具有抗炎生物活性，基因毒性比较数据库（CTD）中未检索到基因毒性信息；三白草内酰胺具有抗肿瘤活性，CTD中未检索到基因毒性信息。以上检索结果进一步证实了鱼腥草中5种马兜铃内酰胺生物碱的安全性。
在药理学中，药物的药效或毒性与药物剂量密切相关。一种药物，只有达到一定的浓度，才会产生治疗作用或毒副反应。为了科学、客观地评价鱼腥草的毒性，本文对鱼腥草中马兜铃内酰胺含量进行了系统梳理。
Prôbstle等[9]和Bauer等[10]研究表明，每350 g干鱼腥草中含有马兜铃内酰胺BII、马兜铃内酰胺Kim等[12]报道每2 kg干鱼腥草中含马兜铃内酰胺BII、胡椒内酰胺A、马兜铃内酰胺AII分别为25、13、7 mg。Qu等[13]测定每10 kg鲜鱼腥草中含马兜铃内酰胺BII、马兜铃内酰胺AII、三白草内酰胺、胡椒内酰胺A、马兜铃内酰胺FII分别为2、6、10、5、6 mg。姚新生团队[14-15]报道每5 kg干鱼腥草中含马兜铃内酰胺BII、胡椒内酰胺A、马兜铃内酰胺AII分别为28.1、4.1、21.9 mg。
根据文献报道[9-15]结合不同季节鱼腥草鲜品与干品的平均折干比换算[21]，每千克鲜鱼腥草中5种马兜铃内酰胺生物碱含量见表1。
细辛果实中马兜铃酸Ⅰ的含量，结果为95～2200 mg/kg，最高值为2200 mg/kg，约为鱼腥草中总马兜铃内酰胺的760倍。由此可见，鱼腥草中总马兜铃内酰胺的含量远低于毒性药材中马兜铃酸的含量。假定上述5种马兜铃内酰胺的致毒力与毒性最强的马兜铃酸Ⅰ相当，按照《中国药典》中关木通、青木香、细辛日服临界剂量换算，若要达到中毒剂量，鲜鱼腥草的服用量为2.3～60 kg/d，远超正常食用、药用剂量。故从剂量-毒性角度来看，含鱼腥草药物潜在的致毒剂量高，安全窗口大。
3 鱼腥草安全性的实验研究
丁超[28]采用横断面研究，分析了中国各地区人群鱼腥草食用习惯对肾脏疾病的影响。结果显示，不同鱼腥草食用指数组别间肾病患病率无显著性差异。在调整了年龄、性别等混杂因素后，鱼腥草的食用习惯仍然与急慢性肾病患病率无相关性，且未发现罹患泌尿系统恶性肿瘤的病例。
鱼腥草的醇提取物、鲜汁原液和可食用部分均含有马兜铃内酰胺成分，研究表明鱼腥草醇提取物和鲜汁原液无基因毒性、致突变性和致畸性，食用鱼腥草与急慢性肾病患病率无相关性。多项研究共同说明了鱼腥草及其提取物无基因毒性的特性，这与本文探讨鱼腥草中马兜铃内酰胺的构效关系、量效关系得出的结论相吻合。
3.2 含鱼腥草制剂的安全性
当前，已批准的含鱼腥草制剂涵盖口服制剂、眼用制剂、鼻用制剂、注射剂等多种剂型，其中口服制剂和外用制剂的安全性均较好。复方鱼腥草颗粒和复方鱼腥草滴丸治疗急性上呼吸道感染不良反应发生率极低，与对照组相当[29-31]；鱼腥草滴眼液、鱼腥草滴鼻液和鱼腥草鼻用喷雾剂等局部给药制剂，临床使用安全可靠，未见明显不良反应[32-37]。含鱼腥草制剂的不良反应更多发生在注射剂领域。2006年2月，浙江金华1例4岁患者在静脉滴注鱼腥草注射液时发生抽搐、昏迷等严重不良反应事件；2006年5月，湖北武汉1例3岁患者在静脉滴注鱼腥草注射液时发生过敏性休克，不治身亡[38]；2006李连达等[41]进一步测算，鱼腥草注射液的实际致死率约为0.000 021%，远低于青霉素、庆大霉素等化学药注射剂。但笔者认为，鱼腥草注射液应进行严格的安全性再评价及质量控制，对于这类制剂的使用现阶段仍应持审慎态度。
相比于注射剂，含鱼腥草的口服制剂及外用制剂的安全性更高，未见严重不良反应事件报道。对于含鱼腥草药物安全性的评价，应以不同的剂型、不同的给药方式分开看待。
4 结语
鱼腥草清热解毒、消痈排脓、利尿通淋，为治疗肺痈之要药。作为药食同源植物，鱼腥草药用、食用历史均已逾千年，我国西南地区更有常年食用鱼腥草的习惯。本文从鱼腥草中马兜铃内酰胺的化学结构出发，从构效关系、量效关系、实验研究等方面深入探讨了鱼腥草的安全性，结果表明含鱼腥草的食品及口服、外用药品具有较高的安全性。
（1）鱼腥草中含有5种结构的马兜铃内酰胺（马兜铃内酰胺BⅡ、马兜铃内酰胺AⅡ、胡椒内酰胺A、马兜铃内酰胺FⅡ、三白草内酰胺），它们在鱼腥草中质量分数（1.2～2.9 mg/kg）非常低，远低于含马兜铃酸毒性药材中有毒组分含量（仅为毒性药材中马兜铃酸Ⅰ质量当量的1/10 000～1/660），正常食用或制成药物摄入量十分有限；（2）这5种结构的马
本文从化学单体、部分提取物、鱼腥草药材及制剂3个维度进行了深入分析，这3个维度彼此联系，互相佐证，由量效关系、构效关系结合植物提取物的实验结果外推至鱼腥草药材的安全性，并与现有含鱼腥草口服外用制剂的临床研究相结合，辩证分析了鱼腥草在不同使用方式下的安全性，希望能够推动鱼腥草医药大健康产品的研发工作，同时为含鱼腥草药品的合理应用提供指导和依据。
利益冲突 所有作者均声明不存在利益冲突
参考文献（略）
来 源：尹明星，陈 婧，施春阳，王文清，方建国．从马兜铃内酰胺探讨鱼腥草安全性 [J]. 中草药, 2021, 52(19): 6045-6051 .