瑞禧定制-FITC/TRITC/Cy3标记外泌体功能化修饰荧光
外泌体(Exosome)是指包含了复杂 RNA和蛋白质的膜性膜泡 (30-150nm),其直径在30-150nm左右。外泌体的形成过程:细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中而形成外泌体。
外泌体天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中,所有培养的细胞类型也均可分泌外泌体。
制备荧光标记外泌体的步骤如下∶
1.取200 ug/ml的C5-马来酰亚-Alexa488(绿色荧光)或C5-马来酰亚-Alexa633(红色荧光)2.5 ul,加入提取好的含60- 100 ug蛋白质的30ul外泌体样品中,以PBS补足至50ul ,不搅拌的情况下于暗室中室温孵育60分钟。
⒉.在孵育时将exosome spin columns ( Invitrogen )试剂盒按照说明书准备好并将粉末树脂于室温下水合15-30分钟。
3.将装有柱子的收集管于离心机水平转子中以750x g离心2分钟,弃收集管,向树脂中加入荧光染料孵育后的外泌体
4.将柱子置于1.5ml微量离心管750x g离心3分钟,多余的染料会被树脂吸附
5.荧光标记后的外泌体缓慢加入1000ul不含酚红的DMEM,于0.22um过滤膜过滤后。分装并储存于负80度备用。
人类原发性垂体腺瘤中提取外泌体lncRNA H19
脂毒性肝细胞分泌的外泌体miR-192-5p
肝脏外泌体来源的miR-130a-3p
神经元外泌体
转移性黑色素瘤外泌体PD-L1
常氧胶质瘤衍生的外泌体(N-GDEs )
缺氧胶质瘤衍生的外泌体( H-GDEs )
肿瘤细胞分泌的包裹仿生多孔硅纳米颗粒的外泌体(E-PSiNPs )
成牙本质细胞分泌外泌体
神经元来源的外泌体Aβ42、T-tau和P-T181-ta
外周循环外泌体miR-155
宫颈癌细胞分泌的外泌体miR-221-3p
M2型小胶质细胞衍生的外泌体(M2-EXO )
活化肝星状细胞分泌外泌体
人源肝癌细胞HepG2外泌体
胰腺β细胞外泌体
HPV阳性头颈部鳞状细胞癌外泌体
人脐带间充质干细胞来源的外泌体
小胶质细胞外泌体
人骨髓间充质干细胞( BM-MSC)来源的外泌体
更多相关动态欢迎关注小编瑞禧定制(YQ2021.1)