小鼠急性心梗(MI)模型造模方法
心肌梗死是发达国家居民的主要致死因素之一,在我国也随着国民生活习惯的改变及胆固醇摄取量的增加而不断增加。研究心肌梗死发生的机制,不但可以预防心肌梗死的发生,也将为制定新的治疗方案用于治疗心肌梗死提供理论依据。但是心肌梗死的研究及治疗由于没有合适的动物模型一直受到很大限制。到目前为止,已有许多动物模型被报道,其中小鼠急性心梗模型就是常用心梗模型之一。
01
动物模型制备:
1、实验动物:
C57BL/6J小鼠 ,雄性,
体重:22g±2g,
周龄:6-8周,
动物等级:SPF级
2、手术方法:
动物深度麻醉,确认麻醉状态后,备皮,安装好心电监护仪,消毒局部皮肤,铺洞巾后剪开肋间皮肤,钝性分离肌肉、打开心包膜,将心脏推出体外,暴露左冠状动脉前降支,用6-0无菌丝线快速结扎,打实结,看到心脏底部变白,用荷包缝法迅速关闭胸腔,挤压防止气胸,造成左室前壁心肌缺血。分别记录术前、缺血时心电图变化。
3、手术后护理及观察:
a、术后饲养护理:术后单笼饲养,常规饲
料及饮水。
b、术后行为观察:每天观察动物死亡或濒
死情况、精神状态、行
为活动、进食等。
c、伤口局部观察:术后每天1次,观察伤
口有无红肿发炎等。
d、体重称量记录:术后2次/周,称重并记
录体重变化情况。
02
实验操作及检测平台:
▲实时心电监护,输出心电图
▲动物心脏超声及数据分析
▲Micro-CT、PET-CT
▲心脏TTC染色
▲灌胃、腹腔、尾静脉等多途径给药 、大小鼠
眼底静脉丛、大动物静脉采血
▲HE、masson,天狼猩红染色
▲免疫组化、免疫荧光、凋亡(Tunel)
▲病理读片,分析梗死面积、胶原百分比
▲透射电镜分析
▲WB、QPCR 心梗相关血清指标检测
(CK-MB、cTnI、Myo等)
PET-CT
TTC
病理
正常小鼠心脏HE染色 模型小鼠心脏Masson染色
03
特点:
1、制备过程技术娴熟,最大限度的保证入组动
物梗死程度均一。
2、不存在因气管切开而引起的窒息死亡。
3、创伤小,恢复快,最大限度减少人为因素对
实验结果的干扰。