小鼠腹腔注射的基本操作过程及注意事项

腹腔注射的方式适用于脂肪、肌肉、胰腺、肠道等全身器官,以及新生鼠(造成的损伤较小),通过这种递送途径,肠道的平滑肌及浆膜感染概率更大,可以观测到散在的GFP染色,但是上皮细胞感染的概率较小。

具体步骤如下:

腹腔注射示意图

1. 实验前准备

准备内容:小鼠、病毒液 ( 冰浴融化)、1ml 注射器。

吸取病毒:用 1ml 注射器吸取适量病毒,置于冰上备用。

2. 小鼠固定

a. 首先提取小鼠尾巴,将其放在鼠笼盖或手臂上,并进行适当安抚;

b. 然后左手握小鼠,用拇指和食指捏住小鼠颈背部,用无名指及小指固定其尾和后肢,确保小鼠躯体舒展且不能乱动。

3. 病毒注射

a. 右手取吸好病毒的注射器,翻转左手使小鼠头部朝下且腹部完全暴露给操作者;

b. 手持注射器在下腹部离腹白线约 0.5cm 处下针,使针头与小鼠腹部约成 30°夹角刺入腹部,刺入过程中如感觉到抵抗力突然消失,表明针头已进入腹腔,此时调整针头方向约与小鼠腹部平行,缓缓进针;

c. 针头进入适当距离后,匀速注射病毒液后,缓缓拔出针头 ( 旋转针头以避免漏液)。

4. 动物复苏

将小鼠放回原饲养笼中,注意观察小鼠状态。

除了系统性的递送方式外也可通过局部注射的方式实现AAV的递送,肠道方向包括灌肠和肠系膜动脉注射的方式,优点是病毒剂量更小、可以直接感染需求部位,但同时也具备一定的缺点,那就是对动物造成的损伤更大。

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