生化检测样本收集及寄送注意事项
生化检测主要的样本类型可以分为血液样本、组织样本和细胞样本。
1. 血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
(1)不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
(2) 抗凝收集血浆:收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。生化实验一般建议用肝素抗凝。
选择抗凝的注意点:
(1) 每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
(2) 收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
(3) 抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
(4) 抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
2. 组织样本的收集:
(1) 样本采集:取组织块(一般每种组织需0.2g以上)在冰冷的生理盐水中漂洗,除去血液,滤纸拭干,准确称重,放入冻存管或离心管中。
(2)样本保存:动物组织样本暂时不测定,可立即低温冻存,温度越低越好,中间如不反复冻融,-20℃以下可保存三个月,-70℃以下可保存六个月。
3. 细胞样本的收集:
细胞沉淀的收集:
(1) 悬浮细胞:对于悬浮培养的细胞,直接通过离心收集细胞沉淀,将培养液在室温条件下1000转/分,离心10分钟,弃上清留细胞沉淀。
(2) 贴壁细胞:对于贴壁培养的细胞,用胰酶将细胞消化下来,或用细胞刮将细胞刮下来,将培养液在室温条件下1000转/分,离心10分钟,弃上清留细胞沉淀。
细胞培养液的收集:
收集细胞培养液,将培养液在室温条件下1000转/分,离心10分钟,吸取上清至新的EP管中冻存。
4. 样本的运输、转存
样本收集齐后-80℃冻存,将冻存的标本,放置在装有5-10公斤干冰的泡沫盒中密封保存运输。(干冰保证-40℃的温度,防止样本的反复冻融,5-10公斤的干冰可以保证5-7天的温度)。