组织学技术 固定(1)
固定:利用化学试剂将组织内的成分凝固,防止组织和细胞的死后变化,保持其与生活时状态相仿。
使组织成分凝固的化学试剂称固定剂。可以是固体的(如重铬酸钾、苦味酸、升汞,配成水溶液),也可以是液体的(如甲醛、酒精、三氯醋酸、冰醋酸等)
固定剂:
液体:甲醛、酒精、三氯醋酸、醋酸(冰醋酸)
固体:重铬酸钾、升汞、三氧化铬、多聚甲醛、苦味酸、锇酸
1 常用固定剂的特性与用途
(1)甲醛
甲醛易溶于水,在水中的溶解度为36~40%(商品名福尔马林)。酸性,有强烈刺激味。
甲醛久存产生乳白色沉淀为三聚甲醛。
甲醛与空气接触将近被氧化成甲酸而增加酸性。
常用10%甲醛:甲醛10毫升,加水90毫升。
甲醛渗透力强,固定均匀。组织膨胀5%左右,酒精脱水时收缩较大。
能保存脂肪和类脂,不能沉淀核蛋白和白蛋白。
甲醛为还原剂,不能与铬酸、重铬酸钾、锇酸等混合,24小时失效。
长期固定于甲醛 的组织,会产生暗褐色结晶样沉淀称福尔马林色素。它多沉着于充血、出血及血液溶解的组织如肝、脾。该色素不溶于水、酒精、二甲苯、甘油、丙酮、脂溶剂和稀酸,且影响染色效果。可用下法除去。
氨过氧化氢浸泡法:将未染色的切片浸泡于3%过氧化氢水溶液25毫升加浓氨水1滴1~2小时,充分水洗后染色
氨酒精浸泡法:将切片浸泡于25%氨水1毫升加75%酒精200毫升30分钟,水洗后染色
碱酒精浸泡法:将切片浸泡于1%氢氧化钠或氢氧化钾1毫升和75%酒精 100毫升10分钟,水洗后染色
2 酒精(乙醇)
无色透明液体。
可沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白。
能溶解脂肪和类脂。
能沉淀糖,但遇水能溶解。
还原剂,不能与铬酸、重铬酸钾、锇酸等混合使用。
常用95%酒精配成各种浓度的酒精。
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