SW480细胞基因敲除案例

CRISPR/Cas9已被广泛用于疾病模型建立、药物靶点干预和治疗方法开发。已有多项研究使用CRISPR/Cas9对SW480等结直肠癌细胞系进行基因编辑,从而探索Ras、p53等信号通路在结直肠癌发生过程中的生物学功能和潜在干预靶点。

建立METTL3敲除SW480细胞系以研究RNA的m6A修饰在结直肠癌中的作用:

Jihao Xu等人利用CRISPR/Cas9技术建立了METTL3敲除SW480细胞系,并发现METTL3敲除导致了SOCS2的mRNA降解速度减缓,其表达量上调,从而导致细胞增殖被显著抑制(图5)。该研究很好地例证了RNA的m6A修饰是结直肠癌肿瘤发生过程的重要参与者。

图 5

利用CRISPR/Cas9技术在SW480中引入SNP rs6854845 G > T突变,并探究该突变对染色体和基因表达的影响:

单核苷酸多态性(SNP)与疾病有密切联系,包括癌症发生。Zhuangzhi Cong等人利用CRISPR/Cas9技术分别在原代结肠上皮细胞、SW480和HCT116中引入了SNP rs6854845 G > T突变,并且检测了这一突变对染色体高级结构和基因表达的影响。结果表明这一突变只影响正常结肠上皮细胞的染色质高级结构和基因表达,而SW480和HCT116结肠癌细胞对此耐受,从而暗示了细胞癌变会逃脱正常多态性对染色质构象和基因表达的调控(图6)。

图 6

可以看出,CRISPR/Cas9技术已经在癌症治疗的研究中起到了关键作用,作为新兴的基因编辑工具,它的确独具优势。

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