腺病毒载体AVV应用前景
腺病毒载体AVV是无包膜的线性双链DNA病毒,在自然界分布广大,至少存在100种以上的血清型。其基因组长约36kb,两端各有一个反向末端重复区(ITR),ITR内侧为病毒包装信号。基因组上分布着4个早期转录元(E1、E2、E3、E4)承担调节功能,以及一个晚期转录元负责结构蛋白的编码。早期基因E2产物是晚期基因表达的反式因子和复制因子,早期基因E1A、E1B产物还为E2等早期基因表达所。因此,E1区的缺失可造成病毒在复制阶段的流产。E3为复制非区,其缺失则可以大大地扩大插入容量。腺病毒载体大多以5型(Ad5)、2型(Ad2)为基础,新增了55型(Ad55),很多研究机构在研究当中,55型将比5型流行以及使用更具广大性。
使用优势:腺病毒载体转基因效率高,体外实验通常接近的转导效率;可转导不同类型的人组织细胞,不受靶细胞是否为分裂细胞所限;容易制得高滴度病毒载体,在细胞培养物中重组病毒滴度可达(10E+11)/ml;进入细胞内并不整合到宿主细胞基因组,仅瞬间表达,安全性高。因而,腺病毒载体在基因**临床试验方面有了越来越多的使用,成为继逆转录病毒载体之后广大使用且具前景的病毒载体。
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