shRNA 筛靶
针对不同靶点设计的shRNA敲降效果往往不同,所以,在进行RNA干扰实验之前,有必要进行有效shRNA的筛选,在3-5条shRNA中筛选1-2条干扰效率最高的shRNA ,以进行后续实验。
若293等工具细胞中有目的基因高表达,则可直接导入shRNA表达载体进行筛选。而如果293等细胞中目的基因表达量低,则需要额外共转染一个目的基因的过表达载体,人为地创造一个目的基因高表达环境,以便于shRNA的筛选和验证。
实验流程图
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针对不同靶点设计的shRNA敲降效果往往不同,所以,在进行RNA干扰实验之前,有必要进行有效shRNA的筛选,在3-5条shRNA中筛选1-2条干扰效率最高的shRNA ,以进行后续实验。
若293等工具细胞中有目的基因高表达,则可直接导入shRNA表达载体进行筛选。而如果293等细胞中目的基因表达量低,则需要额外共转染一个目的基因的过表达载体,人为地创造一个目的基因高表达环境,以便于shRNA的筛选和验证。
实验流程图