条件性过表达Tet-On系统技术实验流程
利用Tet-On激活型系统原理,当Dox不存在时,rTetR不能与TRE结合,导致目的基因不被过表达;而当Dox存在时,rTetR与TRE结合,进而使目的基因过表达。构建Rosa26-(SA/pCAG)-rtTA-TRE-PminCMV-cDNA-Pa重组载体,将重组载体插入Rosa26 基因Intron 1中,通过外源性给予Dox诱导目的基因稳定过表达。
条件性过表达Tet-On系统技术优势
避免随机整合转基因小鼠模型中出现的多拷贝数、多位点插入、表达不稳定等问题;
可通过外源性给予Dox和去除Dox从而在时间上调控目的基因的稳定过表达。
条件性过表达Tet-On系统实验流程
赞 (0)