微生物冻干机在活性乳酸菌冻干粉制备工艺
微生物冻干机在活性乳酸菌冻干粉制备工艺流程原材料→乳杆菌的活化→菌体的收集→菌泥的冷冻干燥。
主要包括如下工艺步骤:
1、原材料: (1)乳酸菌;(2)培养基(IL):蛋白胨10g、酵母膏5g、牛肉膏10g、葡萄糖20g、磷酸甘油二钠、磷酸氢二钾2g、柠檬酸三氨lg、乙酸钠5g、硫酸镁0.Sg、硫酸锰0.25g、吐温80 1ml、琼脂30g,PH值6.2?6.4,用蒸馏水定容至1000ml,115-120℃灭菌30mino
2、乳杆菌的活化:将冷藏的乳杆菌用10ml灭菌的上述液体培养基进行第一次活化,活化温度40℃,30小时后平板检测纯度和活菌数,检测达标后再将上述10ml菌液全部转入至500ml灭菌所述液体培养基进行第二次活化,30小时后板检测纯度和活菌数,检测达标后转至40L发酵罐中进行扩大培养72小时。
3、菌体的收集:利用超速离心机对发酵后的菌液进行离心,在转速为4000^6000r/min的条件下离心20分钟,去上清收集沉积物。
4、菌泥真空冷冻干燥:将步骤3收集到的沉积物加入至复配保护剂,用振荡器混匀,制成菌悬液;再将其盛入冷冻平皿中,随后先置5℃冰箱平衡45分钟后,控温在-30℃冷冻60分钟,然后控温在-80℃冷冻60分钟,再在冻干机设备上冷冻干燥15小时,然后密封保存于4℃冰箱中;真空冷冻干燥条件设置冻干室温度为-60℃ -70℃,压力为0.006Pa,时间为14小时。
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