薄层层析硅胶板层析法知识点

一. 薄层层析法基础知识：

薄层层析又叫薄板色谱，是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，属固-液吸附色谱，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点，一方面适用于少量样品（几到几毫克，甚至0.01毫克）的分离，另一方面再制作薄层板时，把吸附层加厚加大，又可用来精致样品，此法特别适用于发挥性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。此外，薄层色谱法还可用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种“预试”。

二. 色谱条件：

（1）.固定相选择：

柱色谱中提到的吸附剂都可以用作为薄层色谱的固定相，分离性能及使用选择同柱色谱的选择原则相同。

一般用于薄层色谱时，要求吸附剂的粒度更小。商品吸附剂区分为色谱级（用于柱色谱）和薄层色谱级（用于薄层色谱）。

（2）.展开剂选择：

薄层色谱展开剂的选择和柱色谱一样，主要根据样品中各组分的极性、溶剂对于样品中各组分溶解度等因素来考虑，展开剂的极性越大，对化合物的洗脱力也越大。

选择展开剂时，除参照表列溶剂性来选择外，更多地采用实验的方法，在一块薄层板上进行实验：

①. 若所选展开剂使混合物中所有的组分点都移到了溶剂前沿，此溶剂的极性过强。

②. 若所选展开剂几乎不能使混合物中的组分点移动，留在了原点上，此溶剂的极性过弱。当一种溶剂不能很好地展开各组分时，常选择用混合溶剂作为展开剂，先用一种极性较小的溶剂为基础溶剂展开混合物，若展开不好，用极性较大的溶剂与前一溶剂混合，调整极性，再次试验，直到选出合适的展开剂组合。合适的混合展开剂常需要多次仔细选择才能确定。

（3）.相对移动值：从点样原点开始到展开

后的溶剂前沿，是溶剂的移动距离，记为l1，混合物中个组分的移动距离分别记为l1，l2，l3……

在不同的展开条件下，各化合物的移动距离不会相同，而在同一条件下，相对于展开剂的移动距离，各化合物有可比较的展开数据，称为相对移动值会比移值：Rf=l1/l0，在相同条件下测得的比移值可以作为化合物的薄层色谱特征值进行比较对照。