让你一文读懂什么是化学发光免疫分析
什么是化学发光?
化学发光:在常温下由化学反应产生的光,产生电子能级处于激发态的物质,后者通过跃迁释放能量产生光子,从而导至的发光现象。化学发光是一个多步骤的过程。
化学发光按照发光时间可分为:
闪光(Flash): 发光时间在数秒内,如吖啶酯,以原位进样和时间积分法测量。
辉光(Glow): 发光时间在数十分钟以上,如:HRP-Luminol系统、AP-AMPPD系统、黄嘌呤氧化酶系统,无须原位进样,以速率法测量。
什么是化学发光免疫分析?
化学发光免疫分析(CLIA) 诞生于1977年,是近十年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分析,将高灵敏的化学发光技术与高特异性的免疫反应结合起来建立的微量测定技术,因此该技术灵敏度高、线性范围宽、应用范围广。
根据发光体系的不同进行分类,可将化学发光分为:化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析、电化学发光免疫分析法、光激化学发光免疫分析。
化学发光免疫分析(直接化学发光)
化学发光免疫分析(CLIA),用化学发光试剂直接标记抗体或抗原的一类免疫检测方法。
鲁米诺类标记的化学发光免疫分析:鲁米诺类物质的发光为氧化反应发光。在碱性溶液中,鲁米诺可被许多氧化剂氧化发光,其中H2O2最为常用。
吖啶酯类标记的化学发光免疫分析:吖啶酯在H2O2和OH-条件下,能迅速发光,吖啶酯衍生物标记效率高且稳定性好,因此吖啶酯作为标记物用于免疫分析,发光体系简单、成本低,具有较低本底且能快速检测。
化学发光酶免疫分析(酶促化学发光)
化学发光酶免疫分析(CLEIA)属酶免疫分析,只是酶反应的底物是发光剂。目前常用的标记酶为辣根过氧化物酶(HRP )和碱性磷酸酶(ALP)。
电化学发光免疫分析
电化学发光免疫分析(ECL)是指由电化学反应引起的化学发光过程。ECL的反应在电极表面进行,发光底物为三联吡啶钌,以三丙胺(TPA)来激发光反应,它包括电化学和化学发光两个过程。ECL的突出优点:标记物非常稳定;发光时间长、灵敏度高、线性范围宽、反应时间短。