教你如何简便进行转录因子(TF)预测
高通量测序火了不止一年两年,很多时候我们都是先找到自己心仪的相关基因,然后进行下游靶基因的验证。其实,我们还可以往上游做,以丰富机制研究的深度。也就是查找基因的启动子以及转录因子预测。那今天我们就来唠唠转录因子预测分析吧~
转录因子也称反式作用因子,在动植物的生长发育及其对外界环境的反应中起着重要的调控作用,已成为现在生物学研究领域的热点,其功能分析是重要的研究内容之一。因此我们可以通过转录因子注释,或者可通过表达量聚类分析,筛选出关注生物学问题过程中起主要调控作用的一些转录因子。并且可以结合WGCNA鉴定的基因模块,筛选关键转录因子在基因模块中是否为hub gene,并通过预测转录因子的靶基因(MEME),筛选出基因模块中的靶基因,建立以转录因子为hub gene的调控网络。
转录因子相关的文章有很多,例如2015年发表在Proc Natl Acad Sci的一篇文章,作者通过玉米种子吸水膨胀不同阶段的转录组数据,鉴定玉米子叶发育各阶段相关转录因子(TF)其靶向位点(TFBS)。我公司成功案例也有类似的文章,比如2016年发表在Plant Cell Physiol上的一篇文章,介绍的是异源表达DREB转录因子(AtDREB1A)提高转基因丹参抗旱性的调控机制。
那这个时候问题就来了,如何简单快捷的进行转录因子的注释研究呢?同志们,福利来了~百迈客云(BMKCloud)免费为您提供转录因子注释工具,助力各位科研君进行深度的数据挖掘!
情景一:如您在我们公司有做项目,那当结题报告和分析结果将会在百迈客云(BMKCloud)上进行展示,您可在测序项目中直接进行转录因子。
操作步骤:登录百迈客云首页(www.biocloud.net)——我的项目——报告——基因结构挖掘——转录因子预测,选择对应数据库(植物or动物),点击提交即可。Yes,就是这么easy!
情形二:利用免费小工具进行分析。操作步骤:登录百迈客云首页(www.biocloud.net)——分析——工具
在对话框中输入“转录因子注释”,Enter键进入转录因子注释工具界面
这种方法操作也非常之简便,只要按照要求格式提交基因序列文件然后选择物种即可:
1、 Genes:基因序列文件,支持氨基酸序列或者核酸序列,必须以fa或者fasta做后缀,示例如下:
2、 DEG file:输入基因出自的项目的差异表达文件,该文件第一列为Gene ID,最后一列为基因上下调信息,这两列必须存在,没有可以不用选择
3、 Organism:可以只选择研究的物种,分析速度快;也可以选择All,基于所有物种的转录因子进行比对,结果信息会更全,但是分析速度会变慢。
4、 E-value 进行blast比对设置的期望值,该值越小表示比对特异性越强,核酸一般设置为1e-10,氨基酸一般设置为1e-5
最后筛选出来感兴趣的转录因子,大家可能希望再找到它对应的靶基因。如何预测转录因子靶基因也有很多方法,包括根据转录因子保守性或者是公共数据库进行预测,这部分内容后续我们再具体介绍吧~
参考文献:
1.Wei T, Deng K, Liu D, et al. Ectopic Expression of DREB Transcription Factor, AtDREB1A, Confers Tolerance to Drought in Transgenic Salvia miltiorrhiza[J]. Plant & Cell Physiology, 2016, 57(8):1593.
2.Yu C P, Chen S C, Chang Y M, et al. Transcriptome dynamics of developing maize leaves and genomewide prediction of cis elements and their cognate transcription factors[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 2016, 112(19):E2477.
转录调控事业部 李 娜 | 文案
吴戈宇 | 审核
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