PLoS Biology | 一种30秒内完成DNA提取的方法!
今天给大家推荐一种30秒内完成提取DNA的快速方法。该方法是来自澳大利亚昆士兰大学的研究人员发表在PLoS Biology上的题为“Nucleic acid purification from plants, animals and microbes in under 30 seconds”的论文,开发了一种新的核酸提取方法,利用滤纸可以在30秒内从植物、动物和微生物中快速的完成核酸的提取和纯化。
看看具体过程:
1. 将植物叶片浸入到含有500μL裂解液(20 mM Tris [pH 8.0], 25 mM NaCl, 2.5 mM EDTA, 0.05% SDS)和钢珠的试管中,磨碎。
2. 将滤纸条浸入到上一步粗提液中蘸三次,以便结合核酸。
3. 去掉杂质,将上一步的试纸条浸入到清洗液中(10 mM Tris [pH 8.0], 0.1% Tween-20)3次。
4. 把上一步试纸条浸入到扩增反应液中3次,将核酸洗脱下来,大约3秒。
5. 洗脱液作为PCR扩增的模板进行扩增
利用试纸条提取核酸的流程图
文中用到的材料是Whatman No.1滤纸,当然其他滤纸也是可以的,为了方便手拿,作者建议将试纸条进行简单处理,例如将滤纸的一半浸泡在熔化的蜡中,这样浸过蜡的滤纸可以防水,产生一个疏水区域,便于手拿。
论文链接:
https://journals.plos.org/plosbiology/article/file?id=10.1371/journal.pbio.2003916&type=printable
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