浅析旷场实验诸影响因素对啮齿动物行为的影响

旷场实验是一种通过检测动物自主活动 、活动亢进 、探索活动等行为来研究动物行为的实验 方法。自1941年出现以来 ,因其无创 、相对简单且可以通过改变环境测试动物行为,故在神经精神疾病和神经精神药理方面应用最多 ,最广泛。不同物种在旷场实验中的行为模式有所不同 ,其中对啮齿类动物的行为研究最为多 。旷场实验要受诸多因素的影响如动物遗传变异、性别 、年龄、自主活动实验中的环境改变等。

1、实验环境光线 

在宽广有光的环境中,小鼠很少运动并伴有长时间的停息 ,倾向于停在角落或沿壁活动 ,偶尔行进到场地 中央 ,活动轨迹多为弧线。相反 ,在黑暗或有障碍物的环境中 ,小鼠呈现高频运动。其运动 、静息次数和觅食行为均增加 ,主要在实验场地的中央活动 ,活动轨迹多为旋转式 ,在中央的活动量比光亮环境高 25%~70 %。

2、实验范围大小 

David通过 将实验场地由小到大 、由大到小 、不规则变化三种情况来 研究场地大小对啮齿行 为 的影响 。随着空间的增大或减小 ,大鼠运动停顿的次数均增加。空间越大停顿越多 ;空 间随机变化组开始停顿 次数与空间增大组相同 ,随后与空间减小组相同 。停顿次数总是与最初所处的环境大小有关 ,最初的环境大停顿次数就多。虽然空间大小对停顿次数有明显的影 响 ,但在各种变化过程 中停顿 距离变化不大 。当空间逐渐增大 ,其运动增加,但这种运动距离 很短并伴有相应的停顿 ,二次停顿之间的距离减小。动物运动中的这种停顿 ,认为是由 动物自身一 种不变的、内在的自主探究行为所决定 。

当大鼠进人空场实验环境中,其运动表现为行进和停止交替出现 ,在此过程中动物可能在许多地方停止 ,但有 1~ 2个 地方它 们停止的时间最多 ,停止时间 最长的区域被称为动物的本 垒 区(homebase)。在本垒区其 行为主要表现站立和理毛及在此空间来回运动 。每次来回伴有较多停顿 ,最高的停顿可达 8 ~ 10次 。在大空间中大鼠从本垒区开始运 动 的次 数 明显多于小空间。虽然在大空间中运动的次数增加, 但是运动距离却明显减小 。因此 ,当空间增大时,大鼠表现出高频和短距离的运动 。

在小空间中田鼠自由穿越空间中任意区域 。在大空间中 ,其运动主要集中在周边区 。空场实 验中 , 沿壁运动是实验大鼠显著的行为特性。对于野生动物来说就是呆在有庇护的外周环境 。在有或无庇护的旷场实验中 ,大鼠90% 以上的时间是呆在周边 。不计空间大小 、测试 方 法 、动物接近墙壁的时间占总时间的85% 以上 ,在大空间中这种情况几乎占100% 。动物的趋物性 让其认为有庇护 的环境比空旷环境安全 。空间 由大变小 组 田鼠在中央区运动量大 , 在周边区少 ;在空间由小变大组 ,田鼠运动量减小 ,主要在 周边或转角处运动 ;随机组的运动情况类似空间由大变小组 。

研究结果表明 ,在进行药物诱导的行为改变或对行为产生影响的神经 、基因研究时 ,为使自 主活动的运动量 、时间 、空间分布对行为的影响降到最小 ,空场实验的空间尽可能选用小范围。

3、时 间

啮齿动物在旷场实验中的行为受自身三个因素的影响:探索行为,逃避行为和转移运动。其 中最主要的是探索行为。据报道 ,将动物放人陌生环境中前5min记 录到 的活动表达的是探索行为 。Markel等经过实验证实前5min录到的活动主要是探索行为引起 ,部分可能是由某些增强情感的为在起作用 。因此 ,在进行探索实验时 ,动物行为检测应记录其探索行为最 强的时间段 。大量探究新异环境的自主活动记录时间均为将动物放入新异环境后 ,立即记录动物 5~10min的运动情况 ,这段时间能准确记录动物的探究行为 。由于探究行为的存在 ,为了正确的判断精神类药物对行为的影响 ,旷场实验必须选择正确的测试时间 。在进行咖啡 因实验时Halldner等先将小鼠放入实验环境中适应 30min,对注射咖啡 因后 60min小鼠的行 为进行分析。Kuzmin等则是将小鼠放入实验环境中适应30min,对注射咖啡因后40min分钟的行为进行分析。还的是注射药物后直接记录45min小鼠的行为变化 。在进行精神兴奋药研究时 ,除考虑药物的代谢时间外 , 还必须考虑动物行为受时间的影响 ,以取得准确的实验结果。

通过长时间研究小鼠在空场环境中的行为后发现 ,在放入观察箱开始1h内小鼠有明显频繁的活动,其停留和活动主要集中在生活区(食物和饮水区),其次在周边区 ,很少在中央区 。小 鼠在进入空场的第1h内频繁的活动 ,1h后活动减少 。在活动趋于稳定后 ,小鼠表现出较明显的昼夜活动特点 , 夜间活动增加。

4、混合因素 

当环境光线增强时 ,动物运动很少并伴有长时间的停息 ,倾向于停在角落或沿壁活动 。但在同样的光照环境下 ,增加环境的复杂性 ,如加入形状不同的障碍物 ,小鼠的活动量增加 ,在 远离边缘的范围活动 。有人在测试环境中放入障碍物 ,在光线一定的条件下 ,随着放入物体的增加 ,动物运动停顿的次数增 多 ,运动速度增加 。在空旷有光的环境中小鼠80% 的时间都在边缘活动 ,仅有3% 的时间在中央。增加障碍物后 ,小鼠在中央活动的时间达13 ~ 26% ,在中央停留的频率 也有所增 加 。在无障碍物的大或小的空旷环境 ,不论光线强弱 ,小鼠的活动轨迹均为旋转式 ,并且不停的改变运动方向 。在同样的环 境中加入障碍物 ,小鼠的活动轨迹为直线片断式 ,并且很少改变运动方向。在高强度的光照和噪音的恐惧背景下 ,动物行为表现为 :1)活动增加或探索能力加强 ,直到恐惧背景消失;2)发生木疆或探索能力下降,直到恐惧背景消失 。

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