免疫组化的发展简史
一、免疫组化的发展简史
1941年Coons首先用荧光素标记抗体—检测肺组织内的肺炎双球菌获得成功。
60年代 Akanke建立酶标抗体技术—铁蛋白标记Ab技术
70年代 Stemberger改良上述技术，建立辣根过氧化物酶—抗体过氧化物酶（PAP）技术，使免疫细胞化学得到广泛应用。
80年代 Hsu等建立了抗生物素—生素（ABC）法之后，免疫金-银染色法、半抗原标记法、免疫电镜技术相继问世。
90年代 分子杂交技术、原位杂交技术、免疫细胞化学分类方法迅速发展。
2000年后 各种免疫组化技术更加成熟，使免疫组化技术成为当今生物医学中形态、功能代谢综合研究的一项有力工具。
二、免疫组化的原理
免疫组织化学（Immunohistochemistry；IHC）也称为免疫细胞化学，是利用免疫学方法，用已知的特异性抗体（或抗原）对组织细胞中相应的抗原（或抗体）进行检测，通过化学反应使标记于结合后的特异性抗体上的显色剂（酶、金属离子等），显示出颜色，借助显微镜可观察到组织细胞内标记物显示出的特异性抗原-抗体结合物（阳性反应）。
应用免疫学及组织化学原理，对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。
免疫组化主要利用抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性，即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来，以其作为抗原或半抗原去免疫小鼠等实验动物，制备特异性抗体，再用这种抗体（第一抗体）作为抗原去免疫动物制备第二抗体，并用某种酶（常用辣根过氧化物酶）或生物素等处理后再与前述抗原成分结合，将抗原放大，由于抗体与抗原结合后形成的免疫复合物是无色的，因此，还必须借助于组织化学方法将抗原抗体反应部位显示出来（常用显色剂ＤＡＢ显示为棕黄色颗粒）。通过抗原抗体反应及呈色反应，显示细胞或组织中的化学成分，在显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物，从而能够在细胞或组织原位确定某些化学成分的分布、含量。组织或细胞中凡是能作抗原或半抗原的物质，如蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受体、酶、激素、核酸及病原体等都可用相应的特异性抗体进行检测。
三、免疫组化SP法操作流程
衡道医学
知势而为 成人达己