外泌体检测丨流式细胞术分析
传统的外泌体研究,基本都是用WB之类来检测和表征外泌体,比如用SDS-PAGE电泳可分析Exosome中蛋白的大致含量及种类(通过条带的位置和条带的粗细);2-DE等蛋白组学分析可以知道Exosome中不同蛋白的表达和数量等情况;透射电镜可分析Exosome的大小和形态等,如果想要知道表达部位在哪,就可以结合免疫标记实验进行定位,通过定量PCR可以分析所研究的指标的表达量等。
那么今天就来说说,用于流式细胞仪检测外泌体的强大试剂——Exostep。Exostep外泌体检测试剂盒是一种简单的免疫珠检测外泌体的方法,使用的是与珠子结合的捕获抗体和与荧光染料偶联的检测抗体。
Exostep外泌体检测试剂盒可提供可重复的结果,可与外泌体免疫免疫分型同时进行。 Immunostep ExoStep用于从生物液体(血浆,血清,尿液)或细胞培养基中预富集的人类(也有动物哟)外泌体的流式细胞术分析。
一起来看看它的特点吧~
1.需要的样品量非常少;可重复性;灵敏度更高;动态范围更广;明确的检测;定量分析;直接检测细胞培养上清液和生物液中的外泌体;无需分离或沉淀;允许外泌体捕获细胞群的同时进行免疫表型分析
2.操作步骤简易(如下:)
预富集外泌体——50ul外泌体悬浮液+50ul捕获磁珠——常温过夜孵育——加入1x Assay Buffer 1ml ——加入5ul 检测抗体孵育——加入1x Assay Buffer 1ml ——加入1x Assay Buffer 350ul——洗完后就获得了需要的外泌体——上机检测。怎么样,是不是很简单,很清晰,很明了?
3.有适用各种样本的试剂盒产品,适用的样本有细胞培养样品、血浆、尿液等。
4.可单独提供高效能的外泌体捕获磁珠
从一种细胞类型中纯化特定的外泌体或外泌体亚群表征仍然是一个挑战。Immunostep的人类捕获珠,无需事先进行样品富集程序,就可以从生物体液(血清,血浆,CSF,唾液,尿液等)中分离出特定的外泌体。
5.提供各种人类外泌体抗体标记物(Human EXOSOMAL ANTIBY MARKERS),这些抗体有多种不同的结合形式,有适合外泌体检测的配方。
此外,这些抗体可以与Exostep检测试剂盒结合使用,用于外泌体亚群的特征分析。
6.提供高纯的冻干外泌体标准品
来自人类生物流体(血浆)和不同细胞培养基的zui高纯的冻干外泌体标准品。WB和FCM已对Immunostep冻干标准品进行了验证,其总蛋白质含量和颗粒数量已通过纳米颗粒跟踪分析(NTA)进行了验证。
特点如下:
高纯度外泌体,提供比竞争对手更好的性能
特别的冻干工艺可确保稳定性
通过WB,NTA,细胞计数法和体外功能分析对批次进行详尽的验证