基因定点条件性过表达小鼠技术实验流程

条件性过表达主要通过染色体位点特异性重组酶系统实现，如Cre-loxP、Flp-FRT、Dre-Rox系统等，其中最常用的是Cre-loxP系统。构建Rosa26-(SA/pCAG)-loxP-Stop-loxP-cDNA-pA重组载体，将条件性过表达结构插入到Rosa26基因intron1中。通过与不同Cre小鼠进行交配，从而使目的基因稳定过表达于特异性组织和细胞中，而在其他组织中不表达。

　　基因定点条件性过表达技术优势

　　避免随机整合转基因小鼠模型中出现的多拷贝数、多位点插入、表达不稳定等问题;

　　通过与不同Cre小鼠交配，从而实现在空间上外源基因稳定的可调控表达，避免全身性过表达产生的异常表型;

　　可用于基因或蛋白功能的过表达研究，或基因敲除表型的rescue实验。

　　基因定点条件性过表达实验流程