戏说MALDI-TOF MS的“飞行时间原理”
要说清楚“飞行时间原理”应了解一个物理知识“动能”,即物体由于运动而具有的能量,用E表示,其中:m表示质量,v表示速度,L表示运动的距离,t表示运动L所用的时间,两个物质(m1和m2)能量相等,运动距离相等,就有下面的推导过程:
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由以上公式可得:运动相同的距离,质量与时间的平方成正比。
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再看MALDI-TOF MS的峰图,4365有个峰即为297.34纳秒时检测器检测到正电荷离子(微生物质谱一般是正离子模式),7158有个峰即为336.44纳秒时检测器检测到正电荷离子,峰的高低表示该时间点到达检测器的电荷的量,也称电压强度,即质谱峰图的纵坐标。
另外4365是单一物质还是混合物质不清楚,是什么结构也不清楚,它仅能反馈出在297.34纳秒这个时间点检测器上有电荷。
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已知的蛋白可以在MALDI-TOF MS上出质谱峰,如已知分子量2000的蛋白,可能在2000位置出一个峰(单电荷峰),也可能在1000位置出一个峰(双电荷峰),即MALDI-TOF MS检测的是蛋白。
未知样品的MALDI-TOF MS质谱峰不一定是蛋白峰,是什么?MALDI-TOF MS这个技术做不到检测的是什么物质,它只是一个飞行时间和电压的二维图,微生物检测就是一个未知样品。
已知的核酸在MALDI-TOF MS上出质谱峰就是核酸峰,即核酸检测功能。
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